小鼠尾尖用酒精擦拭尾巴，引起輕微的血管擴張；用無菌手術(shù)刀、刀片或鋒利的剪刀，快速截斷小鼠尾尖1-2毫米。如果需要多次采，之后每次需截除2-3毫米；從尾部像尾尖方向按摩，增加血流；用采集血液；結(jié)束后，按壓傷口或使用止血劑來止血；每次量大約可達。小鼠眼球取血單手保定好小鼠；必要時剪掉小鼠胡須，防止污染血液；輕壓取血側(cè)眼部皮膚，使眼球充血突出；用彎頭鑷夾取眼球并快速在摘??；同時用左手中指輕按小鼠心臟部位，以加快心臟泵血速度；當血液流盡時，用脫臼法處死小鼠；大鼠眼眶取血先將小鼠進行麻醉，大鼠翻正反射消失時不在繼續(xù)麻醉；抗凝處理過的玻璃毛細采樣管，掰成2-3厘米長度；右手食指和拇指輕按眼眶兩側(cè)皮膚，使眼球突出，毛細管從內(nèi)側(cè)的眼球與眼瞼的縫隙處進入，輕輕旋轉(zhuǎn)毛細管，稍微深入眼球后上方，血液流速快的時候4-5滴即可，溫柔的將毛細管取出；用棉簽按壓大鼠眼眶止血，每次可取血50-100微升，將血液放入冰盒中保存。小鼠心臟取血先將小鼠麻醉，稍靠右側(cè)平躺在手術(shù)板上固定；左側(cè)第三四根肋骨間觸摸心臟，跳動明顯，慢慢進針；針有回血停止進針，開始取血；一次可以300到500微升，小鼠存活，放到加熱墊上待小鼠蘇醒后放入籠中。故大腦中動脈阻塞(MCAO)模型被用于局灶性腦缺血的研究。江蘇皮下成瘤動物模型構(gòu)建

角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型一、服務(wù)信息1、動物模型名稱：角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實驗動物種屬：新西蘭兔3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：2~3月齡5、實驗動物體重：6、實驗動物環(huán)境：SPF級二、服務(wù)項目服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價錢DH2021角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型5周詢價1、實驗方法：角膜環(huán)鉆致兔角膜機械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼，再滴**2滴消毒，以保持結(jié)膜清潔。開瞼，滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉，用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切，并滴入2滴氯霉素眼**潤洗，用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細眼剪小心去掉角膜損傷區(qū)域上皮，術(shù)畢，滴氯霉素眼**2滴。2、檢測標準：肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標準:1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項目說明：1、如有特殊要求，請另詢價。2、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動實驗。湖南乳鼠動物模型服務(wù)慢性阻塞性肺疾病是一種具有氣流阻塞特征的慢性和（或）肺氣腫。

酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常組大鼠自由飲水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease，AFL)模型組大鼠自由飲用酒精飲料，其酒精濃度從5%開始，每個濃度維持一周，依次改為10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%，以40%濃度持續(xù)至12周。3、在實驗過程中，各組大鼠均給以普通顆粒飼料，共持續(xù)為12周。4、第12，動物禁食12h，稱重，下腔靜脈取血處死，血液離心取上清備用。【檢測】1、生化指標檢測檢測ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、組織病理學酒精性脂肪肝模型組大鼠肝臟體積增大，明顯腫脹，包膜緊張，邊緣圓鈍，呈奶黃色，切面油膩，腹腔內(nèi)尤以有腹膜后脂肪堆積明顯。HE染色顯示，正常組肝臟內(nèi)無明顯脂肪變性，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝細胞索圍繞靜脈呈放射排列。模型組肝臟彌漫大量脂肪變性，細胞體積增大，呈氣球樣變。3、標志因子水平ELISA法測定血清中TNF-α和ApoB的含量。

3）基因/蛋白質(zhì)表達定性或定量檢測在進行分子檢測的過程中，保持核酸和蛋白質(zhì)的完整性至關(guān)重要，因此在取樣過程中，應(yīng)盡量避免核酸及蛋白質(zhì)的降解。如不注意采樣過程，將會導致樣本中的核酸及蛋白質(zhì)的無差別降解，嚴重影響后續(xù)分子檢測結(jié)果。在條件允許的情況下，組織樣本在離體后應(yīng)立刻裝入凍存管內(nèi)，并立即放入液氮中進行冷凍。在RNA提取樣本的保存過程中，可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進行RNA酶的抑制。針對蛋白質(zhì)提取樣本的保存，我們同樣可以使用商品化的蛋白酶抑制劑進行短期處理。聚合酶鏈式反應(yīng)（PolymeraseChainReaction，PCR）及免疫印跡（Westernblotting，WB），這兩種實驗手段是分子生物學檢測中不可或缺的一部分，也是發(fā)表論文至關(guān)重要的分子檢測數(shù)據(jù)。PCR主要用來對基因在基因組層面或轉(zhuǎn)錄層面的變化進行定性或定量檢測，而WB則主要用來對某一蛋白質(zhì)的表達進行定量檢測。（4）轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學及代謝組學檢測隨著檢測水平及相關(guān)產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，各類組學檢測的價格降低，實驗設(shè)計中也常常運用組學檢測來提升實驗設(shè)計的檔次。在我們進行轉(zhuǎn)錄組學及蛋白質(zhì)組學的檢測過程中，同樣是要首先確保目標RNA或蛋白質(zhì)的片段完整性。因此，外科結(jié)扎膽總管并使膽總管完全阻塞已成為引起嚙齒動物梗阻性膽汁淤積性損傷的常用模型。

所用儀器為bio-rad的化學發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)。結(jié)果見圖1中c和d，可以看出，通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標動物，對本發(fā)明提供的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的構(gòu)建方法進行說明，gm20541基因敲除的路線如圖2所示，具體操作如下：基因敲除小鼠獲取步驟：1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列l(wèi)oxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子；2利用dna同源重組技術(shù)將gm20541基因中的第3個外顯子替換，得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細胞；3利用步驟2得到的胚胎干細胞制備得到含gm20541基因敲除細胞的嵌合體小鼠(圖2)；4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育，在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定：實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結(jié)果，擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r，擴增產(chǎn)物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’；sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結(jié)果見圖3中a。面神經(jīng)受損而致面部表情肌群的運動功能障礙,對患者的心理和日常生活造成很大的影響。湖南哪里有動物模型建模

它主要影響身體內(nèi)的大中動脈，如冠狀動脈、頸動脈、腦動脈和腎動脈等，其發(fā)病機制的主要過程。江蘇皮下成瘤動物模型構(gòu)建

brain：腦組織；liver：肝臟；retina：視網(wǎng)膜，intestine：腸；muscle：肌肉；heart：心臟；kidney：腎臟；spleen：脾；b：圖1中a的統(tǒng)計結(jié)果；c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達；d:圖1中c的統(tǒng)計結(jié)果。圖2：gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線；圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖3：中長距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果；圖中：a：擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產(chǎn)物為；其中a2,3,6,9,10,b1為陽性；b：擴增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr，擴增產(chǎn)物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。圖4：gm20541基因敲除小鼠的鑒定；a：gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果；b：實時定量pcr實驗分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率，證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達；sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖5：暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結(jié)果；圖中：a-c：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖；d：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計。江蘇皮下成瘤動物模型構(gòu)建

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